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马云飞和高寒婚礼的当天，来了一个不速之客——“五号特工组”的老朋友老于，恳请他们再次出山，执行一项别人无法完成的任务：追查盗窃美国核武器资料的双料间谍吉川猛夫。为此，高寒做了落跑新娘，跟随欧阳剑平和李智博赶赴云南接受任务，马云飞和何坚也被迫出山，于是“五号特工组”五位成员：语言专家欧阳剑平、爆破专家李智博、特工马云飞、密码专家高寒、“神偷”何坚再次集结上了前线。同时，日本方面派出了他们的杀手锏，酒井朝香——她是酒井美惠子的亲妹妹，一个手腕更加毒辣凶狠的高级女间谍。 “五号特工组”出师不利，被吉川猛夫还没有暴露的同伙陷害入狱，五号无奈之下集体越狱……一面躲避美军的追捕，一面追击吉川猛夫，最终揪出了美军内部的叛徒，抢在酒井朝香之前找到了失窃的核武器资料。 战事愈演愈烈，前方战场的士兵出现了大规模病毒感染，五号特工组受命调查，路上和这场病毒站的祸首桥本失之...。太行山深处永贺县乐山镇喜泉村出了个名人喜老来。喜老来早就眷恋着东邻乐大妈。眼看他俩就要牵手，乐大妈听说他儿子当上了县长，却给他甩起脸子来。 喜泉村连年柿子大丰收，由于公路不通，乐大妈又愁又急，指桑骂槐地打儿子嘎福。喜老来看看自家院里房上的柿子，听到乐大妈是在骂自己儿子，决定到县城看看县长儿子到底忙什么。临走，他望着乐大妈窗户说：“别以为我去儿子那里享清福，柿子丰收了，你愁我也愁”。。时隔仅仅半年时间，居住在埼玉县上尾市的丸井家三胞胎：长女三叶（高垣彩陽 配音）、（明坂聡美 配音）、三女一叶（戸松遥 配音）卷土重来。三叶继续将自己的御姐女王气质以及S向趣味发扬光大，而减肥和贪嘴仍是她持续面对的重要难题；双叶目测胸围的段数不断提升，其天然呆可爱气质又让人生出暖暖的感觉；一叶的阴郁不断加深，诅咒的本领也越来越强。搞笑故事不断升级，丸井三姐妹再次为观众们带来了无穷多的乐趣…… 本片根据桜井のりお的搞笑萌系漫画改编，第二波TV动画版仅在电视台播送了8话，另有未公开的4话附于随后发行的DVD套装中。。